Klonierung des Phosphatidylinositol binding clathrin assembly proteins (PICALM) und Untersuchung der Interaktion mit dem Protein APP in Verbindung mit der Alzheimer Krankheit

Inhaltsverzeichnis

• Inhaltsverzeichnis
• Datenblatt.
• Abkürzungsverzeichnis
• 1 Einleitung.
• 1.1 Alzheimer Erkrankung.….…………….….…...
• 1.1.1 Epidemiologie und Pathologie..
• 1.1.2 Genetische Risikofaktoren
• 1.1.3 Histopathologie und Amyloid-Hypothese.
• 1.2 Amyloid Precursor Protein...........
• 1.2.1 Prozessierung und intrazellulärer Transport von APP.
• 1.3 PICALM................
• 1.3.1 Expressionsmuster und zelluläre Lokalisation von PICALM.
• 1.3.2 Assoziation von PICALM mit AD.
• 1.4 Zielsetzung......
• 2 Material und Methoden
• 2.1 Material...............
• 2.1.1 Zelllinien..............
• 2.1.2 Bakterienstämme......
• 2.1.3 Kulturmedien
• 2.1.4 Antibiotika.
• 2.1.5 DNA-Vektoren.
• 2.1.6 Oligonukleotide
• 2.1.7 Labormaterialien und -chemikalien.
• 2.1.8 Puffer.
• 2.1.9 Kits..............
• 2.1.10 Antikörper............
• 2.1.11 DNA- und Proteinstandards............
• 2.1.12 Enzyme..........\li>
• 2.1.13 Geräte............
• 2.1.14 Software........…………..\li>
• 2.2 Methoden
• 2.2.1 Zellkulturmethoden..
• 2.2.2 Proteinmethoden .......
• 2.2.3 DNA-Methoden und Klonierung.
• 3 Ergebnisse.….………………………….
• 3.1 Klonierung und Überexpression von PICALM.
• 3.1.1 Expressionstest C-terminal getagter PICALM-Konstrukte.
• 3.1.2 Klonierung von PICALM.
• 3.1.3 Toxizitätsvergleich N- und C-terminal getagter Konstrukte..............
• 3.2 Interaktionstudien von PICALM mit APP.
• 3.2.1 Einfluss der PICALM Überexpression auf endogene APP-Level ...............
• 3.2.2 Einfluss der APP Überexpression auf endogene PICALM-Level..............
• 3.3 Fluoreszenzmikroskopie……………………….
• 3.3.1 Zelluläre Lokalisation von PICALM.
• 3.3.2 Untersuchung möglicher Kolokalisation von PICALM und APP..\n..................
• 4 Diskussion..............
• 4.1 Verwendete Zelllinien
• 4.2 Klonierung und Überexpression von PICALM.
• 4.3 Interaktionstudien von PICALM mit APP
• 4.4 Fluoreszenzmikroskopie
• 4.4.1 Zelluläre Lokalisation von PICALM..
• 4.4.2 Kolokalisationsstudien von PICALM und APP.......
• 5 Zusammenfassung ....
• Literaturverzeichnis
• Eidesstattliche Erklärung.
• Danksagung........

Zielsetzung und Themenschwerpunkte

Die vorliegende Bachelorarbeit untersucht die Rolle des Phosphatidylinositol binding clathrin assembly proteins (PICALM) im Zusammenhang mit der Alzheimer-Krankheit. Ziel ist es, die Interaktion von PICALM mit dem Amyloid Precursor Protein (APP) aufzuklären und die Bedeutung dieser Interaktion für die Entstehung der Krankheit zu untersuchen.

• Klonierung und Überexpression von PICALM in Zellkultur
• Untersuchung der Interaktion zwischen PICALM und APP mittels verschiedener Methoden
• Analyse der zellulären Lokalisation von PICALM und dessen möglicher Kolokalisation mit APP
• Bedeutung der PICALM-APP-Interaktion für die Entstehung der Alzheimer-Krankheit
• Potenzial von PICALM als Zielmolekül für die Entwicklung neuer Therapieansätze

Zusammenfassung der Kapitel

Die Einleitung führt in die Thematik der Alzheimer-Krankheit ein und beschreibt die Rolle von APP sowie PICALM in diesem Kontext. Kapitel 2 beschreibt die verwendeten Materialien und Methoden. Kapitel 3 präsentiert die Ergebnisse der Klonierung und Überexpression von PICALM, die Interaktionstudien mit APP und die Ergebnisse der Fluoreszenzmikroskopie. Die Diskussion analysiert die gewonnenen Daten und setzt sie in den Kontext bestehender Forschungsergebnisse. Schließlich fasst die Zusammenfassung die wichtigsten Ergebnisse zusammen und gibt einen Ausblick auf zukünftige Forschungsrichtungen.

Schlüsselwörter

Alzheimer-Krankheit, Amyloid Precursor Protein (APP), Phosphatidylinositol binding clathrin assembly protein (PICALM), Klonierung, Überexpression, Interaktion, Zellkultur, Fluoreszenzmikroskopie, Kolokalisation, Pathogenese, Therapieansätze.