Bachelorarbeit, 2013
41 Seiten, Note: 2,0
1. Inhaltsstoffe der Erdbeere
1.1. Primärstoffwechsel
1.2. Phenylpropanstoffwechel und Flavonoid-Biosynthese
1.3. Anthocyane
1.4. Flavonole
1.5. Hydroxyzimtsäuren und Hydroxybenzoesäuren
2. Aufgabenstellung
3. Material und Methoden
3.1. Material
3.1.1. Chemikalien
3.1.2. Pflanzen
3.2. Verwendete Geräte
3.2.1. LC-MS Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie
3.2.2. Sonstige Geräte
3.3. Software
3.4. Methoden
4. Ergebnisse
4.1. Bekannte Metabolite
4.1.1. Hydroxybenzoesäure-Glucoseester
4.1.2. Ferulasäure-Glucoseester
4.1.3. p-Cumaryl-D-Glucoseester
4.1.4. Zimtsäure-Glucoseester
4.1.5. Sinapyl-Glucoseester
4.1.6. Kaffeesäure-Glucoseester
4.2. Unbekannte Metabolite
4.2.1. M301
4.2.2. M215
4.2.3. M451
4.2.4. M277
4.2.5. M449
4.2.6. M476
4.2.7. M563
4.2.8. M599
5. Diskussion
Diese Arbeit untersucht die Auswirkungen der Herabregulation des Enzyms FaGT5 in Erdbeerfrüchten auf den sekundären Stoffwechsel, um neue Erkenntnisse über die funktionelle Rolle der dort vorkommenden Glycosyltransferasen zu gewinnen.
1.1. Primärstoffwechsel
Primärmetabolite, wie Kohlenhydrate, Fettsäuren und Aminosäuren, kommen in allen Pflanzen vor und erfüllen dort immer die gleichen Aufgaben. Neben den Primärmetaboliten bilden die Pflanzen aber auch Sekundärmetabolite, wie Alkaloide, Isoprenoide, Anthocyane, Flavonole und Phenylpropanoide. Diese haben keine Funktion im Primärstoffwechsel und sind in den jeweiligen Pflanzen spezifisch. Sie haben dort genau definierte ökologische Aufgaben inne, wie zum Beispiel das Anlocken von Insekten oder den Schutz vor Fressfeinden (Forkmann und Martens, 2001; Davies et al., 2006). Die große Vielfalt der von Pflanzen synthetisierten Sekundärmetabolite wird vor allem durch Modifikation des Grundgerüsts mit unterschiedlichen funktionellen Gruppen erreicht (Jones und Vogt, 2001). Dabei spielt die enzymatische Übertragung von Carboxy-, Hydroxy-, Methoxygruppen und Zuckern eine entscheidende Rolle. So gibt es beispielsweise allein von Quercetin über 300 unterschiedliche Glycoside und über 5000 verschiedene Flavonoide. Diese hohe Anzahl an Sekundärmetaboliten ermöglicht den Pflanzen eine flexible Anpassung an verschiedene Umwelteinflüsse (Bowles et al., 2006).
1. Inhaltsstoffe der Erdbeere: Überblick über die chemische Zusammensetzung der Erdbeerfrucht, inklusive wichtiger Inhaltsstoffe wie Zucker, Säuren, Aromastoffe und Polyphenole.
2. Aufgabenstellung: Definition der Forschungsziele bezüglich der Herabregulation von FaGT5 und der Untersuchung der daraus resultierenden metabolischen Veränderungen.
3. Material und Methoden: Beschreibung der verwendeten Chemikalien, der Pflanzenlinien, der eingesetzten LC-MS-Analytik sowie der präzisen experimentellen Vorgehensweise bei der Probenextraktion.
4. Ergebnisse: Detaillierte Darstellung der identifizierten bekannten und unbekannten Metabolite sowie deren Konzentrationsunterschiede zwischen den untersuchten Gruppen.
5. Diskussion: Interpretation der Ergebnisse im Kontext früherer Forschungsarbeiten und Einordnung der Auswirkungen der Gen-Herabregulation auf den Stoffwechsel.
Erdbeere, Fragaria x ananassa, Glycosyltransferasen, FaGT5, Sekundärstoffwechsel, LC-MS, Metabolite, Flavonoide, Glucosylierung, RNA-Interferenz, Phenylpropanstoffwechsel, Stoffwechselanalyse, Metabolom, Herabregulation, Stoffwechselbiotechnologie
Die Arbeit befasst sich mit der Untersuchung des Sekundärstoffwechsels in Erdbeerfrüchten, insbesondere mit den Auswirkungen einer genetischen Herabregulation bestimmter Enzyme (FaGT5) auf die Konzentration verschiedener Metabolite.
Die zentralen Themen umfassen die Biosynthese von Sekundärmetaboliten (insbesondere Flavonoide und Phenylpropanoide), enzymatische Prozesse wie die Glucosylierung sowie die analytische Charakterisierung von Pflanzeninhaltsstoffen.
Das Hauptziel ist es, neue Erkenntnisse über die Glycosyltransferasen der Erdbeerfrucht zu gewinnen, indem die metabolischen Konsequenzen einer gezielten Reduktion der FaGT5-Aktivität analysiert werden.
Es wird eine analytische Methode basierend auf der Flüssigkeitschromatographie mit Massenspektrometrie (LC-MS) angewendet, um Probenextrakte aus kontrollierten und genetisch modifizierten Erdbeeren zu untersuchen.
Der Hauptteil gliedert sich in eine theoretische Einführung zur Erdbeer-Chemie und Enzymatik, eine detaillierte Auflistung der experimentellen Methoden sowie die Auswertung der Messergebnisse bekannter und unbekannter Metabolite.
Die Arbeit wird durch Begriffe wie Fragaria x ananassa, Glycosyltransferasen, Metabolomanalyse, Sekundärstoffwechsel, LC-MS und RNA-Interferenz charakterisiert.
Die Untersuchung zeigt, dass die Herabregulation auf die meisten untersuchten bekannten Derivate wie Hydroxybenzoesäure-Glucoseester oder Ferulasäure-Glucoseester kaum bis keinen Einfluss hat; lediglich bei p-Cumaryl-D-Glucose konnte eine Konzentrationsänderung festgestellt werden.
Diese Metabolite zeigen signifikante Unterschiede in ihrer Konzentration in Abhängigkeit von der Gen-Herabregulation: M301 ist in der GT5-Gruppe kaum vorhanden, während M451 dort eine erhöhte Konzentration aufweist.
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