Bachelorarbeit, 2016
65 Seiten, Note: 94
RESUMEN
INTRODUCCIÓN
ANTECEDENTES
OBJETIVOS
HIPÓTESIS
MATERIALES Y MÉTODOS
RESULTADOS Y DISCUSIONES
CONCLUSIONES
El presente trabajo tiene como objetivo principal evaluar la actividad antibacteriana de las fracciones peptídicas derivadas de los hidrolizados proteicos de semillas de Mucuna pruriens frente a cepas de Escherichia coli y Listeria monocytogenes, con el fin de explorar su potencial aplicación en la industria alimentaria.
Hidrólisis enzimática
La hidrólisis enzimática se lleva a cabo mediante proteasas, es decir por acción de enzimas que tienen la habilidad de dividir las proteínas en péptidos pequeños y catalizar la síntesis de los mismos bajo condiciones apropiadas. Las principales preparaciones de enzimas comerciales de grado alimentario se encuentran disponibles en el mercado en estado líquido o como pellets secos y participan en una cantidad considerable de reacciones hidrolíticas con diferentes grados de intensidad y selectividad con repercusiones en diferentes áreas como la clínica, la bioquímica, los alimentos, etc. La mayoría de ellas son endoproteasas que producen un gran número de péptidos que difieren entre sí por su peso molecular, dependiendo de su grado de hidrólisis.
Alcalase® 2.4 L es una enzima grado alimentario producida por Novo Nordisk, Bagsvaerd, Denmark. Es una proteasa alcalina serínica de origen bacteriano obtenida del Bacillus licheniformis con actividad endoproteasa, empleada ampliamente por su bajo costo. Su principal componente enzimático es la subtilisina (EC 3.4.21.62). La subtilisina consta de una cadena simple de péptidos de 274 residuos de aminoácidos sin enlaces disulfuro, y tiene una masa molecular de 27.277 KDa con un punto isoeléctrico de 4.9. La enzima presenta amplia especificidad e hidroliza la mayoría de los enlaces peptídicos, preferentemente aquellos que contengan residuos de aminoácidos aromáticos así como también aquellos enlaces donde el sitio carboxílico contenga residuos hidrofóbicos como leucina, tirosina y valina.
INTRODUCCIÓN: Expone la problemática de la resistencia bacteriana en la industria alimentaria y el potencial de las fuentes vegetales, como Mucuna pruriens, para el desarrollo de nuevos antimicrobianos.
ANTECEDENTES: Analiza el fenómeno de la resistencia bacteriana, los mecanismos de transferencia génica y el contexto de las bacterias objeto de estudio.
OBJETIVOS: Define la meta general de evaluar la actividad antibacteriana y los pasos específicos para la obtención y prueba de los hidrolizados.
HIPÓTESIS: Plantea la premisa de investigación sobre la posible actividad antimicrobiana de las fracciones peptídicas contra las cepas seleccionadas.
MATERIALES Y MÉTODOS: Detalla el proceso experimental, desde la obtención de las harinas y concentrados proteicos, hasta las técnicas de hidrólisis, ultrafiltración y ensayos de difusión.
RESULTADOS Y DISCUSIONES: Presenta los datos obtenidos sobre el grado de hidrólisis, el contenido proteico de las fracciones y los resultados negativos de las pruebas de inhibición.
CONCLUSIONES: Dictamina que las fracciones analizadas no presentaron actividad antimicrobiana contra las cepas probadas y sugiere futuras líneas de investigación.
Mucuna pruriens, hidrolizados proteicos, actividad antimicrobiana, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, ultrafiltración, péptidos, seguridad alimentaria, resistencia bacteriana, proteasas, Alcalase, Flavourzyme, pepsina, pancreatina, hidrólisis enzimática.
El estudio se centra en determinar si las fracciones peptídicas obtenidas de la planta Mucuna pruriens poseen propiedades inhibitorias frente a bacterias patógenas de interés alimentario.
Las investigaciones se realizaron sobre cepas de Escherichia coli O157:H7 y Listeria monocytogenes.
El objetivo principal fue identificar fracciones peptídicas con capacidad antimicrobiana para proponer alternativas naturales a los antibióticos convencionales en la industria.
Se empleó una hidrólisis enzimática secuencial utilizando dos sistemas: Alcalase®-Flavourzyme® y Pepsina-Pancreatina, seguido de ultrafiltración por membranas de diferentes tamaños moleculares.
Se evaluó el grado de hidrólisis, el contenido cuantitativo de proteína en las diversas fracciones y su capacidad para generar zonas de inhibición en pruebas de difusión en disco.
Los términos más relevantes incluyen hidrolizados proteicos, péptidos bioactivos, ultrafiltración, resistencia bacteriana y antibiograma.
Las pruebas demostraron que todas las fracciones proteicas evaluadas presentaron resistencia, es decir, ninguna logró inhibir el crecimiento de las bacterias probadas.
El autor sugiere que factores como el pH durante la hidrólisis, el manejo de las muestras (congelación/descongelación) y posibles mecanismos de resistencia de las cepas utilizadas podrían haber afectado la actividad biológica.
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