Diplomarbeit, 1999
100 Seiten, Note: 2,0
1 Einleitung
2 Literaturübersicht
2.1 Inhaltsstoffe von Pilzen
2.1.1 Ernährungsphysiologisch wichtige Inhaltsstoffe
2.1.1.1 Protein
2.1.1.2 Aminosäuren
2.1.1.3 Vitamine
2.1.1.4 Mineralstoffe
2.1.1.5 Spurenelemente
2.1.1.6 Aromastoffe
2.1.2 Pharmakologisch wichtige Inhaltsstoffe
2.1.2.1 Antitumor-Polysaccharide
2.1.2.2 Zytotoxische Substanzen
2.1.2.3 Antimikrobielle Substanzen
2.2 Beispiele
2.2.1 Hericium erinaceus
2.2.2 Lentinus edodes
2.2.3 Ganoderma lucidum
2.3 HeLa-Zellen
2.4 Problemstellung und Ziel der Arbeit
3 Eigene Untersuchungen
3.1 Material und Methoden
3.1.1 Verwendetes Untersuchungsmaterial
3.1.2 Extraktherstellung
3.1.3 Zellkultivierung
3.1.3.1 Herstellung des Zellkulturmediums
3.1.3.2 Passagieren der Zellen mit Trypsin
3.1.4 Ermittlung der Zellzahl mittels Hämocytometer für die Erstellung des Wachstumsverlaufs von Hela-Zellen
3.1.5 MTT-Test
3.1.5.1 Zelleinsaat
3.1.5.2 Extraktzugabe
3.1.5.3 Mikroskopische und photometrische Auswertung
3.2 Ergebnisse
3.2.1 Wachstumsverlauf von HeLa-Zellen
3.2.2 Ergebnisse der Extraktherstellung
3.2.3 Statistische Auswertung
3.2.4 Vergleich von Hericium erinaceus-Fruchtkörpern aus Holland mit -Fruchtkörpern aus chinesischen Provinzen und Ganoderma lucidum hinsichtlich ihrer Wirkung auf HeLa-Zellen
3.2.4.1 Vergleich der Wasserextrakte
3.2.4.2 Vergleich der Ethanolextrakte
3.2.4.3 Vergleich der Pentanextrakte
3.2.4.4 Vergleich des Wasserextrakts mit dem Preßsaft von Hericium erinaceus aus Holland
3.2.5 Dosis-Wirkungskurven und mikroskopische Auswertung der einzelnen Extrakte
3.2.5.1 Hericium aus Holland
3.2.5.2 Hericium aus China
3.2.5.3 Ganoderma
3.2.6 Zusammenfassender Vergleich der Ergebnisse
4 Diskussion
4.1 Bewertung der Methode
4.1.1 HeLa-Zellen
4.1.2 MTT-Test
4.2 Beurteilung der Ergebnisse
4.2.1 Wachstumsverlauf der HeLa-Zellen
4.2.2 Extraktherstellung
4.2.3 MTT-Tests
4.3 Hericium als Heilmittel gegen Krebs
4.4 Ausblick
5 Zusammenfassung
Das Hauptziel dieser Arbeit besteht darin, die Wirkung verschiedener Pilzextrakte von Hericium erinaceus und Ganoderma lucidum auf die Zytotoxizität von HeLa-Krebszellen zu untersuchen und bisherige Forschungsergebnisse vergleichend zusammenzufassen.
2.1.2.1 Antitumor-Polysaccharide
Ein interessanter Weg bei der Bekämpfung von Tumorerkrankungen kann die gezielte Stimulation des Immunsystems darstellen. Darauf baut eine neue Therapieform, die "Immuntherapie" auf, bei der verabreichte Botenstoffe des Immunsystems (Cytokine) oder genetisch identische Antikörper dem Organismus helfen sollen, Krebszellen zu bekämpfen. Denn Krebs kann mit den körpereigenen Abwehrkräften besiegt werden, wenn es gelingt, diese zu aktivieren (OLD 1996).
Eine Möglichkeit die Abwehrkräfte zu aktivieren, sind große Zuckermoleküle (Polysaccharide) aus Pilzen, die im folgenden besprochen werden:
Als 1968 IKEKAWA ET AL. (zit. in CHIHARA 1978) herausfanden, daß Wasserextrakte von Fruchtkörpern einiger Basidiomyceten (Polyporaceae und Mucronoporaceae) bei Mäusen mit implantiertem Bindegewebstumor (Sarkoma 180) starke Wirkungen zeigten, begannen viele Forscher die aktiven Substanzen zu isolieren. Es zeigte sich, daß es sich um Polysaccharide, ß-D-Glucane, handelte (MIZUNO ET AL. 1995a). Später wurden auch Heteropolysaccharide, Glycoproteine, Ballaststoffe, Nukleinsäuren und Lectine identifiziert, die ebenfalls immunstimulatorische Wirkungen zeigten.
1 Einleitung: Stellt den Forschungsansatz zur Nutzung von Pilzinhaltsstoffen in der traditionellen chinesischen Medizin zur Krebsbekämpfung dar.
2 Literaturübersicht: Bietet einen umfassenden Überblick über ernährungsphysiologische und pharmakologische Inhaltsstoffe in Basidiomyceten und stellt die untersuchten Pilze vor.
3 Eigene Untersuchungen: Dokumentiert die methodische Herangehensweise der Extraktherstellung, Zellkultivierung und der Zytotoxizitätstests an HeLa-Zellen.
4 Diskussion: Bewertet die gewählten Untersuchungsmethoden und interpretiert die erzielten Ergebnisse im Kontext der medizinischen Anwendung.
5 Zusammenfassung: Fasst die wesentlichen Erkenntnisse zur zytotoxischen Wirksamkeit der untersuchten Pilzextrakte zusammen.
Hericium erinaceus, Ganoderma lucidum, Lentinus edodes, HeLa-Zellen, Krebsbekämpfung, Zytotoxizität, MTT-Test, Antitumor-Polysaccharide, Immuntherapie, Pilzextrakte, Pharmakologie, Zellkultur, Wirkstoffisolierung, Tumorinhibition, Naturmedizin
Die Arbeit untersucht die Bedeutung chinesischer Speisepilze, insbesondere Hericium erinaceus, für die Krebsbekämpfung durch Analyse ihrer zytotoxischen Wirkung auf HeLa-Zellen.
Im Fokus stehen die Inhaltsstoffe von Pilzen, deren pharmakologische Eigenschaften, die Immunmodulation bei Krebserkrankungen sowie die Kultivierung und Extraktion dieser Wirkstoffe.
Das Ziel ist die vergleichende Zusammenfassung bisheriger Untersuchungen und die Durchführung eigener Versuche zur Zytotoxizität von Pilzextrakten aus verschiedenen Stämmen auf HeLa-Krebszellen.
Zur Bestimmung der Zytotoxizität wurde der MTT-Test eingesetzt, ein photometrisches Verfahren zur Messung der Zellspaltungsaktivität nach Extraktzugabe.
Der Hauptteil widmet sich der detaillierten Beschreibung der Materialen und Methoden der Extraktherstellung sowie der ausführlichen Präsentation der experimentellen Ergebnisse und deren statistischer Auswertung.
Wichtige Begriffe sind Hericium erinaceus, Ganoderma lucidum, HeLa-Zellen, Antitumor-Polysaccharide, Zytotoxizität und Immuntherapie.
Ja, die Arbeit zeigt signifikante Unterschiede in der zytotoxischen Wirksamkeit zwischen gezüchteten Stämmen aus Holland und wild gesammelten Stämmen aus China.
Die Wahl des Lösungsmittels (Wasser, Ethanol oder Pentan) beeinflusst maßgeblich, welche Stoffgruppen extrahiert werden – von wasserlöslichen Polysacchariden bis hin zu lipophilen Fettsäuren.
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